明目地黃膠囊是由熟地黃、菊花、枸杞子、石決明等中藥研制而成,具有滋腎、養(yǎng)肝、明目等生理功效。臨床主要用于肝腎陰虛,目澀畏光,目視模糊,迎風(fēng)流淚的癥狀。中藥作為中華醫(yī)藥學(xué)的瑰寶日益引起全世界的關(guān)注,但由于諸多因素出口占有量不到5 % ,重金屬有害元素超標(biāo)是其中影響因素之一。近年來,有用原子吸收光譜法對大黃和柴胡中的鋅、銅、鐵等元素進(jìn)行了測定,其中不包括鉛、鎘。據(jù)報道鎘元素有化學(xué)致癌作用,進(jìn)入人體后生成難溶物,影響人體的正常機(jī)能,嚴(yán)重者發(fā)生休克、死亡。隨著中藥國際化進(jìn)程的日益加速,許多國家對進(jìn)口中藥材及其中成藥中的重金屬含量均有明確規(guī)定。為了保證用藥安全和有效,我們采用微波消解2石墨爐原子吸收分光光度法測定中明目地黃膠囊重金屬鎘的含量,取得了滿意結(jié)果。
1 儀器與試藥原子吸收分光光度計,鎘空心陰極燈(衡水寧強(qiáng)光源有限公司) ;熱解涂層石墨管;WR/ BP25TC 微波消解儀; 鎘標(biāo)準(zhǔn)液( GSB G62040290 ,1 000mL ,國家鋼鐵材料測試中心鋼鐵研究總院) ; 明目地黃膠囊(廣東眾生藥業(yè)股份有限公司) ;硝酸(優(yōu)級純廣東汕頭西隴化工廠) ;H2O2 (分析純廣州越秀區(qū)新成精細(xì)化工廠) ;其他試劑為分析純。
2 方法與結(jié)果
211 原子吸收分光光度計的工作條件光源用鎘空心陰極燈,波長為22818nm ,燈電流為3mA ,狹縫012mm ,硝酸鎂作為基體改進(jìn)劑,進(jìn)樣體積20μL 。背景校正用氘燈。
212 樣品處理 精密稱取本品內(nèi)容物015g ,置于消解罐中,加硝酸5mL ,過氧化氫2mL ,擰緊、密封。然后放到微波消解儀中進(jìn)行消解,微波消解程序(見表2) 。消解完成后,置電熱板上緩慢加熱到硝酸揮盡,繼續(xù)濃縮到2～3mL ,放冷,用水轉(zhuǎn)入25mL 容量瓶,過濾,即得,同時做空白。
213 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密吸取1000μg•mL - 1的鎘標(biāo)準(zhǔn)液1mL 于100mL 量瓶中,2 %硝酸溶液稀釋至刻度,配成濃度為10μg •mL - 1 鎘標(biāo)準(zhǔn)液; 精密吸取4mL 于100mL 量瓶中,2 %硝酸溶液稀釋至刻度,配成濃度為014μg•mL - 1鎘標(biāo)準(zhǔn)液;再分別吸取014μg•mL - 1 鎘標(biāo)準(zhǔn)液0 ,012 ,015 ,110 ,115 ,210mL ,分別置100mL 量瓶中,2 %硝酸溶液稀釋至刻度,配成濃度為0 ,018 ,210 ,410 ,610 ,810ng•mL - 1的鎘標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,在已設(shè)定的儀器條件下測定,以濃度(C) 為橫坐標(biāo),吸收值(A) 為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸,方程為A = 010551 ×C + 010949 ,r = 0199938 , (n = 6) 。
215 精密度試驗 精密吸取011μg•mL - 1鎘標(biāo)準(zhǔn)液2mL 置于100mL 量瓶中,用011mol•L - 1 硝酸溶液稀釋至刻度,搖勻,在已設(shè)定的儀器條件下測定,重復(fù)5 次,測得鎘的吸光度的RSD 為1155 % (見表3) ,表明儀器精密度良好。
216 穩(wěn)定性試驗 將同一鎘標(biāo)準(zhǔn)液在相同儀器條件下,分別于0 ,2 ,4 ,6 ,8 ,16 和24 h 重復(fù)測定,測得鎘的吸光度的RSD為0163 %(見表4) ,表明鎘在24 h 內(nèi)測定結(jié)果穩(wěn)定。
217 重復(fù)性試驗 按樣品測定項下方法,對同一批號樣品(070801) ,分別取樣平行測定5 次,求得鎘含量的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD 為2109 % , 1 、2 、3 、4 、5 次的鎘含量(ppm) 分別為0156 、0153 、0154 、0154 、0155 ,表明重復(fù)性較好。
218 加樣回收試驗 驗精密稱取約015g 明目地黃膠囊內(nèi)容物,加入Cd 標(biāo)準(zhǔn)液,按“213”項下方法依次操作,進(jìn)樣20μL ,以Cd 的吸光度值代入回歸方程計算回收率,平均回收率為 95138 % ,RSD 為210 %(n = 5) 。
219 樣品測定 取明目地黃膠囊3批,分別精密稱取約015g內(nèi)容物于消解罐中,按“213”項下方法依次操作,進(jìn)樣20μL ,以鎘的吸光度值代入回歸方程計算含量,結(jié)果3 個樣品批號為070801 、070802 、070803 的鎘含量(ppm) 分別為0154 、0156 、0152 。 3 討論
311 石墨爐原子吸收法與火焰原子吸收法相比,具有靈敏度高,試樣用量小等優(yōu)點,尤其適合痕量元素的分析。石墨爐法測定前處理簡便,結(jié)果準(zhǔn)確,精密度好。火焰法前處理要用到甲基異丁酮萃取,毒性較大,而石墨爐法不需用有機(jī)溶劑萃取。石墨爐法檢出限最低為4 ×10 - 13 g , 上機(jī)檢測達(dá)μg•kg - 1 ,火焰法上機(jī)檢測為mg•kg - 1 。故本方法選用石墨爐原子吸收法進(jìn)行測量
312 由于明目地黃膠囊包括的藥材比較復(fù)雜,在測定中產(chǎn)生強(qiáng)烈的背景干擾,因此要盡可能多地除掉基體物質(zhì),減少基體干擾。鎘屬于低溫?fù)]發(fā)性元素,在灰化階段易損失,加基體改進(jìn)劑后,可以提高鎘的灰化溫度,在原子化階段分解為金屬原子而不致?lián)p失。鎘的基體改進(jìn)劑有硝酸、重鉻酸鉀、磷酸銨、磷酸二氫銨、硝酸銨、硝酸鎂等。對不同的基體改進(jìn)劑進(jìn)行了試驗,選擇硝酸鎂作為測定鎘的基體改進(jìn)劑。并且在選定的優(yōu)化條件下,提高灰化溫度,可以有效地消除了背景干擾,改善了原子化吸收峰,提高了靈敏度,使結(jié)果更加準(zhǔn)確。
313 本實驗對不同量的硝酸及過氧化氫用量組合進(jìn)行了分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),隨著硝酸使用量的增加,樣品消化越完全。但是硝酸的殘留越多對測定結(jié)果影響很大。因此,微波消解后, 一定要盡量全部去掉消解液中殘留的硝酸,否則會導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn), 并縮短石墨管的壽命, 經(jīng)過試驗, 我們選定加硝酸5mL ,過氧化氫2mL ,達(dá)到了比較理想的效果。
314 以上結(jié)果表明利用微波消解處理樣品,使得樣品的前處理過程大大縮短,且節(jié)省試劑。減少環(huán)境污染,方法準(zhǔn)確,靈敏快速,非常適合用于明目地黃膠囊中鎘金屬元素的測定分析。
